что значит пересадка костного мозга
Трансплантация костного мозга — способ спасти жизнь
Трансплантация (пересадка) костного мозга используется с семидесятых годов XX века, это сравнительно новый метод лечения. Однако он развивается очень быстро и применяется все шире.
Чаще всего трансплантация костного мозга используется для лечения онкологических больных. Однако существуют и другие заболевания, при которых она рекомендована или даже служит единственным способом излечения.
Идея трансплантации костного мозга (ТКМ) возникла достаточно давно. Уже к началу XX века ученые поняли, что из каких-то немногочисленных клеток в костном мозге могут развиваться все клетки крови; такие клетки костного мозга стали называть стволовыми. Позже возникла мысль, что стволовые клетки из костного мозга здорового человека можно использовать для восстановления неработающего костного мозга другого человека. Иными словами, можно пересаживать с лечебной целью клетки из костного мозга одного человека (донора) другому человеку (реципиенту, то есть получателю).
Первая успешная ТКМ была проведена в 1968 году В семидесятые годы эту процедуру проводили уже десяткам пациентов. Эдвард Доннел Томас, который разработал технику трансплантации костного мозга для лечения лейкоза, в 1990 году получил Нобелевскую премию. Несмотря на сложность процедуры к настоящему времени ТКМ позволила спасти сотни тысяч жизней.
Виды трансплантации костного мозга:
«В НМИЦ им. В. А. Алмазова широко используются аллогенные трансплантации, в том числе и так называемые гаплоидентичные, от частично совместимых доноров (например, от родителей к детям и наоборот). Гены тканевой совместимости в этом случае совпадают лишь на 50 %, но благодаря специальным методам и препаратам этого во многих случаях достаточно. В Центре Алмазова врачи стараются заранее заготавливать и замораживать донорские клетки для ближайших трансплантаций, хотя в обычной практике это делается нечасто», —рассказывает врач-гематолог отделения химиотерапии онкогематологических заболеваний и трансплантации костного мозга Центра Алмазова Дмитрий Васильевич Моторин.
Гаплоидентичные трансплантации, по словам Дмитрия Васильевича, в нынешних условиях чаще, чем обычно, становятся заменой трансплантаций от неродственных доноров.
«Поиск донора сопряжен с определенными трудностями. По статистике, пациент имеет примерно 30 % шансов найти родственно совместимого донора. В остальных случаях приходится искать донора в регистре — шансы найти там донора не очень высокие и зависят от объема регистра и частоты встречаемости генотипа пациента. Но даже если подходящий человек найден, еще не факт, что он станет донором. До непосредственного донорства доходит только четверть доноров. В России ситуация с донорским регистром непростая — он пока еще не очень большой. К тому же генетическая разнородность населения России достаточно велика. Если для людей, живущих в европейской части, шанс найти донора более высокий, то для пациентов, например, из Хакасии, Бурятии, Якутии, Дагестана или Чечни — шансы найти полностью совместимого донора в регистре намного меньше», — подчеркнул гематолог.
В связи с трудностями в поиске подходящего донора костного мозга и вероятностью генетического совпадения с другим человеком история Алины Корф, выпускницы Центра Алмазова, большая удача.
Несколько лет назад она встала в реестр доноров костного мозга, в котором можно находиться всю жизнь, так и не став подходящим донором для кого-то. Внезапно ее HLA-фенотип оказался востребован, расширенный анализ и обследования показали, что она в плане тканевой совместимости фактически генетический близнец пациента, которому требовалась помощь.
Трансплантация костного мозга прошла успешно, пациент выздоровел, Алина прекрасно себя чувствует.
«В донорстве костного мозга нет ничего героического — это нормальный поступок обычного человека. Да, кто-то боится, для кого-то это небезопасно. Я считаю, помогать надо тогда, когда ты чувствуешь в себе ресурс и возможность. Я верю, что хороших людей очень много. Хотелось бы, чтобы было меньше страха перед этой процедурой, тогда можно было бы спасти больше нуждающихся в помощи», — говорит Алина Корф.
Каждая успешная трансплантация означает спасенную жизнь. Для увеличения количества трансплантаций необходимо более широкое распространение метода, открытие новых трансплантационных отделений, обучение профильных специалистов, усовершенствование методов профилактики реакции трансплантат-против-хозяина, развитие гаплоидентичной трансплантации и увеличение количества квот на трансплантацию. Такой высокотехнологичный метод медицинской помощи, как трансплантация костного мозга является примером мультидисциплинарного подхода в медицине. Он возможен только при тесном взаимодействии клинических служб с лабораторией, отделениями функциональной диагностики, станцией переливания крови, звеном амбулаторной помощи, регистрами доноров костного мозга, а также системами дистанционного телеконсультирования на посттрансплантационном этапе. Успехи в трансплантации костного мозга являются нашими общими успехами и способствуют развитию и совершенствованию оказания медицинской помощи.
Все о трансплантации костного мозга
Трансплантация костного мозга может потребоваться, если ваш костный мозг перестал работать и не производит достаточного количества здоровых клеток крови.
При трансплантации костного мозга возможно использование клеток из вашего собственного тела (аутологичная трансплантация) или от донора (аллогенная трансплантация).
Когда необходима ТКМ
ТКМ может быть показана в следующих ситуациях:
Безопасная возможность лечения вашего состояния высокодозной химиотерапией или лучевой терапией с целью замены или спасения костного мозга, поврежденного при лечении
Заменить больной или поврежденный костный мозг новыми стволовыми клетками
Обеспечение новыми стволовыми клетками, которые могут помочь уничтожить раковые клетки напрямую
Трансплантация костного мозга может принести пользу людям с множеством патологий, как злокачественной, так и доброкачественной природы заболеваний, например:
Острый лейкоз (Acute leukemia)
Адренолейкодистрофия (Adrenoleukodystrophy)
Апластическая анемия (Aplastic anemia)
Синдром недостаточности костного мозга (Bone marrow failure syndromes)
Хронический лейкоз (Chronic leukemia)
Гемоглобинопатии (Hemoglobinopathies)
Ходжкинская лимфома (Hodgkin’s lymphoma)
Иммунодефициты (Immune deficiencies)
Врожденные ошибки метаболизма – наследственные болезни обмена веществ (Inborn errors of metabolism)
Множественная миелома (Multiple myeloma)
Миелодиспластические синдромы (Myelodysplastic syndromes)
Нейробластома (Neuroblastoma)
Находкинские лимфомы (Non-Hodgkin’s lymphoma)
Нарушения плазматических клеток (Plasma cell disorders)
POEMS – синдром (POEMS syndrome)
Первичный амилоидоз (Primary amyloidosis)
Трансплантация костного мозга имеет много осложнений, некоторые из которых потенциально фатальные.
Риск может зависеть от многих факторов, включая тип заболевания или состояния, тип трансплантации, возраст и здоровье человека, получающего трансплантацию.
Хотя некоторые люди испытывают минимальные проблемы с пересадкой костного мозга, у других процесс может протекать с осложнениями, которые могут потребовать лечения или госпитализации. Некоторые осложнения могут даже угрожать жизни.
Осложнения, которые могут возникнуть при трансплантации костного мозга, включают:
Реакция трансплантат против хозяина – РТПХ (только аллогенная трансплантация)
Недостаточность стволовых клеток (трансплантат)
Повреждения органа
Инфекции
Катаракта
Бесплодие
Новые виды рака
Смерть
Ваш врач может объяснить ваш риск осложнений от трансплантации костного мозга. Вместе вы можете взвесить риски и преимущества, чтобы решить, подходит ли вам пересадка костного мозга.
РЕАКЦИЯ ТРАНСПЛАНТАТ ПРОТИВ ХОЗЯИНА: ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ РИСКИ, КОГДА СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ ПРИВНОСЯТСЯ ОТ ДОНОРОВ
В случае если Вам проводится трансплантация, при этом используются стволовые клетки от донора (аллогенная трансплантация), у вас может быть риск развития заболевания реакция трансплантат против хозяина (РТПХ). Это состояние возникает, когда донорские стволовые клетки, которые создают вашу новую иммунную систему, воспринимают Ваши ткани и органы организма как нечто чужеродное и атакуют них.
У многих людей, которым проведена аллогенная трансплантация, в какой-то момент развивается РТПХ. Риск развития РТПХ выше в случае поступления стволовых клеток от неродственного донора, но это может произойти с любым, кому проведена трансплантация костного мозга от донора.
РТПХ может произойти в любое время после трансплантации. Однако это чаще встречается после того, как ваш костный мозг начал создавать здоровые клетки.
Существует два типа РТПХ: острый и хронический. Острый тип РТПХ обычно происходит раньше, в течение первых месяцев после трансплантации. Это обычно отражается с вовлечением в процесс кожи, пищеварительного тракта или печени. Хронический тип РТПХ обычно развивается позже и может поражать многие органы.
Признаки, симптомы хронического типа РТПХ:
Суставная либо мышечная боль
Одышка
Постоянный кашель
Изменение видения, такие как сухость глаз
Изменения кожи, включая образование рубцов на коже или снижение эластичности кожи
Высыпания
Желтушность кожи и склер глаз (желтуха)
Сухость во рту
Язвы рта
Боль в животе
Диарея
Тошнота
Рвота
Претрансплантационные тесты и процедуры
Вам необходимо будет пройти серию анализов и исследований с целью диагностики Вашего общего состояния организма и статуса для того, чтобы удостовериться, что Ваш организм готов для проведения ТКМ. Обследование может занять несколько дней или даже более.
Помимо этого, врач установит длинную тонкую трубку (центральный венозный внутривенный катетер) в крупную вену в верхней части груди или шее. Катетер, часто называемый центральной линией, обычно остается на месте в течение всего периода лечения. Команда врачей по ТКМ будет использовать центральную линию, для введения извлеченных ранее для ТКМ стволовых клеток, а также различных медикаментов и препаратов крови в ваше тело.
СБОР СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ДЛЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ
В случае если планируется проведение ТКМ с использованием ваших собственных стволовых клеток (аутологичная трансплантация), Вам будет проведена процедура, называемая аферезом (af-uh-REE-sis), с целью сбора стволовых клеток крови.
Перед аферезом Вам будут проводиться ежедневные инъекции фактора роста для увеличения производства стволовых клеток и приумножения стволовых клеток в вашей циркулирующей крови, для того, чтобы их можно было собрать.
В случае если планируется трансплантация с использованием стволовых клеток донора (аллогенная трансплантация), вам понадобится донор. Когда у вас есть донор, производится забор стволовых клеток у этого человека с целью последующей трансплантации. Этот процесс часто называют забором стволовых клеток или забором костного мозга. Стволовые клетки могут использоваться полученные из крови вашего донора или костного мозга. Ваша команда трансплантатов решает, что лучше для вас в зависимости от вашей ситуации. Ваша трансплантационная команда врачей наилучшим образом определит, какой тип трансплантации Вам подходит в Вашей конкретной ситуации.
Другой тип аллогенной трансплантации использует стволовые клетки из крови пуповины (пересадка пуповинной крови). Матери могут сделать выбор в сторону пожертвования пуповинной крови из пупочного канатика после рождения детей. Кровь из пуповины замораживается и хранится в банке пуповинной крови, пока это не понадобится для трансплантации костного мозга.
После того, как Вы прошли предтрансплантационное обследование, у Вас начинается проведение процесса кондиционирования. В процессе кондиционирования Вам проводится химиотерапия и возможно лучевая терапия с целью:
Уничтожения раковых клеток в случае если Вы проходите лечение по поводу метастазирования
Подавления Вашей иммунной системы
Подготовка Вашего костного мозга для новых стволовых клеток
Вариант процесса кондиционирования, который Вам проводится зависит от множества факторов, включая Ваше заболевание, общее состояние организма и тип планируемой ТКМ. Вам может быть показано проведение химиотерапия и лучевая терапия вместе или только одно из вышеупомянутого, как компонент этапа кондиционирования.
Побочные эффекты процесса кондиционирования могут быть следующими:
Тошнота и рвота
Диарея
Выпадение волос
Язвы полости рта, трещины
Инфекция
Кровотечение
Бесплодие
Анемия
Усталость
Катаракта
Органные недостаточности, такие как сердечная, печёночная или лёгочная недостаточности
Вам возможно будут назначены медикаменты, либо процедуры, направленные на предотвращение и уменьшение данных эффектов.
СНИЖЕНИЕ ИНТЕНСИВНОСТИ КОНДИЦИОНИРОВАНИЯ
Основываясь на Ваш возраст и истории болезни, Ваш врач может рекомендовать более низкие дозы или различные виды химиотерапии или лучевой терапии для Вашего лечения. Это называется кондиционирование с пониженной интенсивностью.
Кондиционирование с пониженной интенсивностью уничтожает некоторое количество раковых клеток и несколько подавляет Вашу иммунную систему. Затем клетки донора вводятся в Ваше тело. Донорские клетки с течением времени заменяют клетки Вашего костного мозга. Иммунные факторы донорских клеток могут затем бороться с Вашими раковыми клетками.
ЧТО ВЫ МОЖЕТЕ ОЖИДАТЬ
ВО ВРЕМЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ КОСТНОГО МОЗГА
Трансплантация костного мозга происходит после завершения процесса кондиционирования. В день вашей трансплантации, называемого нулевым днем, стволовые клетки вводятся в ваше тело через вашу центральную линию.
Инфузия, введение внутривенно, донорских клеток безболезненно. Во время процедуры вы бодрствуете.
Трансплантированные стволовые клетки проникают в ваш костный мозг, где они начинают создавать новые клетки крови. Производство новых клеток крови может занять несколько недель, после чего, соответственно, ваши показатели крови смогут начать восстанавливаться.
Костный мозг или стволовые клетки крови, которые были заморожены и разморожены, содержат предохраняющее вещество, которое защищает клетки. Незадолго до трансплантации вам могут быть назначены лекарства для уменьшения побочных эффектов, которые могут быть вызваны предохраняющим веществом. Вам также, вероятно, будет произведено внутривенное введение жидкости (гидратация) до и после пересадки, чтобы помочь вашему организму избавиться от предохраняющего вещества.
Побочные эффекты предохраняющего вещества могут включать:
Головная боль
Тошнота
Одышка
Странный вкус во рту, когда вводится предохраняющее вещество
Не каждый испытывает побочные эффекты от предохраняющего вещества (консерванта), а для некоторых людей эти побочные эффекты минимальны.
ПОСЛЕ ВАШЕЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ КОСТНОГО МОЗГА
Когда новые стволовые клетки поступают в ваше тело, они начинают распространяться по всему вашему телу и в ваш костный мозг в том числе. Со временем они увеличиваются в количестве и начинают создавать новые здоровые клетки крови. Это называется приживление. Обычно требуется несколько недель, прежде чем количество клеток крови в вашем организме начнет нормализовываться. У некоторых людей это может занять больше времени.
В дни и недели после трансплантации костного мозга у вас выполняется забор анализов крови и проводятся другие исследования для контроля вашего состояния. Вам может понадобиться назначение медикаментов для лечения осложнений, таких как тошнота и диарея.
После трансплантации костного мозга вы будете находиться под непосредственным медицинским мониторингом. Если у вас отмечаются инфекционные или другие осложнения, вам может потребоваться пребывание в больнице в течение нескольких дней или иногда дольше. В зависимости от типа пересадки и риска осложнений вам нужно оставаться рядом с больницей в течение нескольких недель или месяцев, для осуществления тщательного мониторинга.
Вам также могут потребоваться периодически переливания эритроцитов и тромбоцитов, пока ваш костный мозг не начнет производить достаточное количество этих клеток самостоятельно.
Вы можете подвергаться большему риску заражения или других осложнений в течение нескольких месяцев до нескольких лет после трансплантации.
ТКМ может привести к излечению от некоторых болезней, некоторые болезни переходят благодаря ТКМ в ремиссию. Цели трансплантации костного мозга зависят от вашей индивидуальной ситуации, но обычно включают в себя контроль или лечение болезни, продление вашей жизни и улучшение качества жизни.
Некоторые люди переносят трансплантацию костного мозга с небольшими побочными эффектами и осложнениями. Другие испытывают многочисленные сложные проблемы, как краткосрочные, так и долгосрочные. Тяжесть побочных эффектов и успех трансплантации варьируются от человека к человеку, а иногда может быть трудно предсказуемым моментом до трансплантации.
Это может быть обескураживающим, если в процессе трансплантации возникают серьезные проблемы. Тем не менее, иногда полезно помнить, что есть много выживших, которые также переживали очень трудные дни в процессе трансплантации, но в конечном итоге успешно прошли трансплантацию и вернулись к нормальной деятельности с хорошим качеством жизни.
Жизнь после ТКМ и в ожидании ТКМ может быть не лёгкой, пациенты могут иметь страхи и опасения. Потому обычно создаются группы поддержки и психологической помощи.
НОВЫЕ ВАРИАНТЫ ЛЕЧЕНИЯ
В случае если ваша трансплантация костного мозга была с использованием стволовых клеток от донора (аллогенная трансплантация), вы можете быть подвержены риску возникновения РТПХ. Это возникает вследствие атаки тела реципиента трансплантированными стволовыми клетками донора. Врачи могут назначать лекарства, чтобы помочь предотвратить РТПХ и снизить реакцию вашей иммунной системы (иммунодепрессанты).
После пересадки вам понадобится время для восстановления вашей иммунной системы. Вам могут быть назначены антибиотики для профилактики инфекций. Вам также могут назначаться противогрибковые, антибактериальные или противовирусные препараты. Врачи продолжают изучать и разрабатывать несколько новых лекарств, включая новые противогрибковые препараты, антибактериальные препараты, противовирусные препараты и иммунодепрессанты.
ДИЕТА И ПИТАНИЕ
После трансплантации костного мозга вам, возможно, потребуется отрегулировать свою диету, чтобы оставаться здоровым и предотвратить чрезмерное увеличение веса. Поддержание здорового веса может помочь предотвратить высокое кровяное давление, высокий уровень холестерина и другие негативные последствия для здоровья.
Ваш специалист по питанию (диетолог) и другие члены вашей команды по пересадке будут работать с вами над созданием плана здорового питания, который отвечает вашим потребностям и дополняет ваш образ жизни. Ваш диетолог может также дать вам советы по питанию для контроля побочных эффектов химиотерапии и лучевой терапии, таких как тошнота.
Ваш диетолог также предоставит вам полезные варианты и идеи для использования в вашем плане питания. Рекомендации вашего диетолога могут включать:
Ежедневно есть много фруктов и овощей
Есть преимущественно мясо птицы и рыбы
Питание цельнозерновыми хлебами, злаки и другие продукты
Иметь достаточное количество клетчатки в вашем ежедневном рационе
Питье молока с низким содержанием жиров или употребление других обезжиренных молочных продуктов, чтобы поддерживать достаточное количество кальция
Поддержание низкосолевой и обезжиренной диеты
Следовать рекомендациям по безопасности пищевых продуктов
Избегать алкоголя
Употреблять достаточное количество воды и других жидкостей каждый день
Избегать употребление грейпфрута и грейпфрутового сока из-за их влияния на группу иммунодепрессантов (ингибиторы кальциневрина)
После трансплантации костного мозга вы можете сделать физические упражнения и физическую активность регулярной частью своей жизни, чтобы продолжать улучшать свое здоровье и фитнес состояние. Регулярное упражнение помогает вам контролировать свой вес, укреплять кости, увеличивать выносливость, укреплять мышцы и поддерживать здоровье сердца.
Ваша группа врачей может работать с вами, чтобы создать рутинную программу упражнений для удовлетворения ваших потребностей. Вы можете выполнять упражнения ежедневно, такие как ходьба и другие виды деятельности. По мере выздоровления вы можете медленно увеличить свою физическую активность.
Пересадка костного мозга. Показания к пересадке костного мозга, подготовка к операции и послеоперационная реабилитация
1. Что такое пересадка костного мозга?
При ряде тяжелых заболеваний функция стволовых клеток искажается, в результате чего нарушается процесс кроветворения. Кровяных телец определённых групп становится слишком мало, или воспроизводятся они незрелыми, слишком большими, неспособными адекватно выполнять свои «задачи».
Долгое время единственным способом лечения онкологических заболеваний была химиотерапия. Надо признать, что это вынужденное, но очень тяжёлое лечение с применением высокотоксичных веществ. Механизм действия химиотерапии таков, что вместе с больными клетками происходит массовая гибель и здоровых клеток, которых иногда и без того уже организм вырабатывает недостаточно. Но даже с таким отчаянным и очень мощным лечением многие больные были обречены, а некоторые из-за общего истощения с трудом переносили саму терапию.
Пересадка костного мозга, применяемая совместно с традиционным лечением, восполняет стволовые клетки, разрушаемые болезнью и дополнительно страдающие от лекарств. Для многих пациентов это единственный шанс продлить жизнь или полностью выздороветь.
2. Совместимость костного мозга, получение костного мозга от донора
Совместимость костного мозга
Схема лечения с использованием донорского костного мозга включает два этапа:
Получение костного мозга от донора
В зависимости от роста и массы реципиента, ожидающего пересадки, необходимое количество донорского материала может составлять от 950 до 2000 мл. Забор костного мозга происходит под общим наркозом, хотя не требует никаких разрезов кожи или тканей. Через проколы в тазовых и бедренных костях у донора в несколько приёмов шприцем изымается костный мозг, перемешанный с кровью. После процедуры забора костного мозга возможна болезненность в местах проколов, как после удара по кости, но обычно по выходу из состояния наркоза никаких неприятных ощущений не остается, и за несколько недель объём костного мозга у донора полностью восстанавливается.
Собранный материал при необходимости исследуется, очищается и замораживается.
3. Подготовка больного к пересадке костного мозга
Затем больному в крупную вену шеи устанавливается катетер, через который будет вводиться в организм донорский материал, а также все необходимые для восстановления лекарства.
4. Приживление костного мозга
До того момента, когда пересаженные стволовые клетки приживутся в новом для них организме и начнут работать, производя кровь и возвращая утраченный иммунитет, проходит 2-4 недели. В течение всего этого периода главной задачей является, в буквальном смысле слова, сохранение жизни больному. Высокие дозы химиотерапии перед трансплантацией полностью уничтожают иммунитет, состав крови почти не позволяет организму самостоятельно бороться с инфекциями и предотвращать кровотечения. На поддержание жизнедеятельности направлен ряд регулярных процедур: переливания крови, профилактический приём антибиотиков, постоянный ввод препаратов, снижающие риск отторжения нового костного мозга.
Принимаются также чрезвычайные асептические меры, по возможности исключающие занесение в палату вирусов и бактерий. Строго ограничиваются посещения, предметы и еда, которые передаются больному. Сам больной при необходимости выйти из палаты надевает перчатки, халат и маску, чтобы уменьшить риск инфицирования в нестерильной среде. Воздух в палате подвергается постоянной фильтрации и очистке.
Ежедневно у больного проводится забор анализов крови, позволяющий контролировать процессы приживления костного мозга и динамику выработки кровяных телец. По мере того, как новые стволовые клетки начинают выполнять свои функции, постепенно отменяются реабилитационные процедуры и снижается уровень изоляции от окружающей среды.
Весь период реабилитации длится от 4 до 8 недель. Большую часть времени состояние пациента остаётся достаточно тяжёлым: тошнота, выраженная слабость, поносы, лихорадка, изъязвление слизистых, кровотечения. Самочувствие схоже с симптоматикой гриппа, только очень затяжного, что само по себе истощает и без того ослабленный организм. Состояние изо дня в день может колебаться от удовлетворительного до очень тяжёлого. При всех болезненных и опасных проявлениях оказывается срочная симптоматическая медицинская помощь.
Когда анализы показывают, что приживление костного мозга прошло успешно и больной больше не нуждается в поддерживающих и реабилитационных процедурах, врач принимает решение о выписке пациента. Как правило, ещё в течение года с этого момента человек не может вернуться в состояние полной работоспособности. Он очень слаб и должен регулярно посещать больницу для контроля состава крови, получения некоторых препаратов и даже переливаний крови, поскольку в этот период уровень необходимых кровяных телец может сильно снижаться. Не рекомендуется посещение мест большого скопления людей, полноценная активная жизнь и привычная деятельность не представляются возможными до тех пор, пока не произойдёт полное восстановление сил и не будет достигнута стабильность в работе нового костного мозга.
Необходимо отметить, что, несмотря на тяжесть процедуры и все опасности восстановительного периода, удачная пересадка костного мозга спасает жизнь и в значительной степени восстанавливает качество жизни. Оказавшись на грани неизбежной, казалось бы, смерти и «чудом» избежав ее, многие выздоравливающие переоценивают своё отношение к миру, заново открывая для себя то, что действительно важно.